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蜂蜜中抗生素殘留量檢測(cè)技術(shù)方法

更新時(shí)間:2014-09-30      點(diǎn)擊次數(shù):2681

鄭州澤銘科技產(chǎn)品——對(duì)蜂蜜中抗生素殘留量的檢測(cè)技術(shù)方法

1 主題內(nèi)容與適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用微生物管碟法測(cè)定蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于天然或加工蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測(cè)定。
2 原理
樣品中四環(huán)素族抗生素經(jīng)Mcllvaine緩沖液提取后,用SEP-PAK C18柱純化四環(huán)素族三種抗生素四環(huán)素、土霉素及金霉素利用薄層層析生物檢測(cè)法進(jìn)行分離和定性;以蠟樣芽胞桿菌為試驗(yàn)菌株,出微生物管碟法進(jìn)行定量檢測(cè)。
3 試劑
所用試劑均為分析純,水為蒸餾水。
3.1 Mcllvaine緩沖液(PH 4):稱(chēng)取磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)27.6g、檸檬酸(C6H8O7·H2O)12.9g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2g,用水溶解后稀釋并定容1000mL。
3.2 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH4.5):稱(chēng)取磷酸氫二鉀13.6g,用水溶解后稀釋并定容1000mL,115℃滅菌30min,置4℃冰箱中保存。
3.3 5%乙二胺四乙酸二鈉鹽水溶液。
3.4 Waters SEP-PAK C18柱(或產(chǎn)PT-C18柱):用時(shí)先經(jīng)10mL甲醇濾過(guò)活化,再用10mL蒸餾水置換,然后用10mL 5%乙二胺四乙酸二鈉鹽流過(guò)。
3.5 標(biāo)準(zhǔn)抗生素:四環(huán)素、土霉素、金霉素標(biāo)準(zhǔn)品由衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所提供。
3.6 抗生素標(biāo)準(zhǔn)原液和稀釋液
3.6.1 抗生素標(biāo)準(zhǔn)原液配制:稱(chēng)取四環(huán)素、土霉素、金霉素標(biāo)準(zhǔn)品適量(按效價(jià)進(jìn)行換算),用0.01mol/L鹽酸溶解并定容1000?g/mL,置4℃冰箱中(可使用7天)。
3.6.2 抗生素標(biāo)準(zhǔn)稀釋液配制:臨用前取上述原液按1∶0.8劑距用0.1mol/L磷酸鹽緩沖液逐步稀釋配制成標(biāo)準(zhǔn)稀釋液。制備四環(huán)素、土霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)濃度為0.16,0.21,0.26,0.32,0.40,0.50?g/mL,參考濃度為0.25?g/mL;制備金霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)濃度為0.033,0.041,0.051.0.064,0.08,0.10?g/mL,參考濃度為0.05?g/mL。定性試驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)液濃度四環(huán)素、土霉素為2?g/mL,金霉素為1?g/mL。
3.7 展開(kāi)劑:正丁醇醋酸-水(4∶1∶5)。

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